شماره آزمایش:3

موضوع:برش گیری و رنگ آمیزی

هدف: برش گیری و رنگ آمیزی

وسایل و مواد:ساقه نعناع،آب،آبکش،پلیت،آب ژاول،آبی متیل،کارمن زاجی

تئوری:برای آن که بخش های مختلف یک اندام شناسایی و مطالعه شود از بافت گیاهی برش میگیریم و پس از آن برش ها را به وسیله ی مواد رنگ کننده رنگ آمیزی میکنیم. در مطالعه ی اندام شناسی(اندام ساقه،ریشه،برگ،محتویات سلول مورد نظر نیست. بلکه نوع بافت اهمیت دارد.برای این که یک اندام گیاهی را برای مدت طولانی نگهداری کنیم از فیکساتور (fixator) استفاده میکنیم. نمونه ی آن محلول فیکساتور F.A.A است که شامل فرمالین ،استیک اسید و الکل می باشد.

Fixator:

              : F.A.Aالف)محلول    

       فرمالین,استیک اسید,الکل

ب)نسبت مساوی از الکل،گلیسیرین،آب مقطر                                                                                

شرح: برش گیری از ساقه نعناع را با تیغ انجام میدهیم و پس از آن برش ها را درون یک آبکش کوچک میریزیم و آب کش را در ظرف محتوی آب مقطر قرار میدهیم تا برای مراحل رنگ آمیزی آماده شود، قبل از رنگ آمیزی باید محتویات داخل سلول تخلیه گردد به همین منظور از آب ژاول که با نام تجاری وایتکس(که رقیق شده باشد و 20 برابرش آب مقطر باشد) در بازار موجود است استفاده میکنیم.

1)تخلیه درون سلولی:20/1 -20/2 آب ژاول میریزیم و برش های گرفته شده را درون آبکش(کوچک) میریزیم و در آبژاول برای 15-20 دقیقه قرار میدهیم.

2)شستشو:سپس برش ها را با آب مقطر میشوییم.

3)رنگ آمیزی: برش ها را برای رنگ آمیزی بافت های سلولزی یعنی لیگنین هنوز رسوب نکرده در آبی متیل یا سبز متیل به مدت 4-7 ثانیه قرار می دهیم.

4) شستشوی چندین باره ی برش ها برای خروج رنگهای اضافی

5)رنگ آمیزی: برش ها را برای رنگ آمیزی بافت های چوبی(آوند های چوبی) در کارمن زاجی یا قهوه ای بیسمارک به مدت 15-20 دقیقه قرار میدهیم.

6)شستشوی چندین باره ی برش ها

این رنگ آمیزی رنگ آمیزی مضاعف نام دارد یعنی هم بافت های سلولزی و هم چوبی همراه همرنگ می شوند اما رنگ آمیزی ساده به ترتیبی است که هدف مطالعه ی فقط یک نوع بافت است مثلا اگر بخواهیم بافت کوتینی یا چوبی یا چوب پنبه ای را مشاهده کنیم برش را به مدت چند ثانیه در آبی متیل یا سبز متیل قرار میدهیم.

نتیجه: بافت های چوبی قرمز و بافت های سلولزی آبی میشوند.